美国FiberCell systems有限公司一直**于提供简单易用的中空纤维细胞培养系统, 让研究人员和生物技术公司生产高质量的细胞及细胞产物。大量成果是使用传统的细胞培养方法不能达到的。
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单抗生产
重组蛋白
内皮细胞
体外毒性研究
条件培养基
病毒
外泌体
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1. 中空纤维采用亲水性聚砜/聚氯乙烯,形成不同滤过率的中空纤维膜,适合批量 生产不同分子量大小的生物活性物质(单克隆抗体,重组蛋白等)。
2. 大量中空纤维组装成波浪状结构,提供悬浮细胞*佳的生长环境。
3. 中空纤维容量为有限的几十毫升,高密度的细胞浓度降低血清需求量。
4. 采用双式系统,节约空间,整个系统可置于任何标准大小的培养箱中。
5. 操作简单,每天仅需15min的维护时间,收获产物,检查葡萄糖消耗。
6. 节约成本,不需要更换耗材,可进行长达六个月的细胞培养。
7. 可替代传统的培养耗材,培养瓶,滚瓶,小鼠腹水等。
8. 产物产量高,纯度好,利于产物的后期处理。
9. 三维的培养空间更好的模拟了生物体内环境,利于细胞长期生长,保持不分化状态,是科研必不可少的工具。
FiberCell中空纤维细胞培养系统的结构介绍
FiberCell整个细胞培养系统由3部分组成,中空纤维培养筒、蠕动泵和储液瓶。细胞接种于中空纤维培养筒中;储液瓶盛装细胞培养基,通过硅胶管与培养筒相连接;培养筒固定在蠕动泵上面,蠕动泵通过挤压硅胶管使培养基在培养筒中循环流动,提供营养物质并进**体交换。系统小巧方便,适用于放入市面上任何尺寸大小的二氧化碳培养箱。
中空纤维采用亲水性polysulfone/PVC (聚砜/聚氯乙烯),形成不同滤过率的中空纤维膜,适合批量生产不同分子量大小的生物活性物质(单克隆抗体,重组蛋白等)。
中空纤维生物反应器的一个特点是培养的细胞浓度可以超过108/mL。而一般的旋转烧瓶培养的哺乳动物细胞浓度大约是106/mL。高浓度细胞可以产生高浓度分泌蛋白,并能进行有效地细胞感染,还可以减少细胞对血清的需求甚至使细胞在无血清培养基中生长。
FiberCell中空纤维培养系统(Hollow fiber cell culture bioreactor)应用领域:
1) 单克隆抗体试验生产或量产Monoclonal Antibodies: 每月可生产100 mg-2000 mg抗体,比用培养瓶生产抗体的浓度高100倍,可达到0.5-5 mg/mL;
2) 重组蛋白表达或量产 Recombinant Proteins :每天可生产1-10 mg重组蛋白,生产分泌蛋白的表达量是培养瓶培养的100倍,可达到100-500μg/mL;
3) 病毒扩增 Virus Production: 运用 Virus Production可生产超过1-3×1013 病毒颗粒,相当于20个滚瓶的产量;
4) **细胞扩增培养及研究 Lymphocyte Expansion: 细胞培养浓度可达1×108/mL;
5) 病原体培养 Malaria Culture一次培养可收获相当于60个T25培养瓶的产量。
6) 体外毒性研究与分析 In Vitro Toxicology ; 检验**、抗病菌(包含HIV/HBV/HCV)以及抗寄生虫等**反应、研究及生物测试;
7) 条件培养液和细胞因子的生产 Conditioned Medium & Cytokine Production ;
8) 内皮细胞 /肌细胞培养及形态研究 Endothelial Cells/Muscle Cells : 在纤维内培养内皮细胞的同时,可在纤维外层培养另一种细胞(如血管平滑肌细胞)。纤维内表面积相当于一个 T75培养瓶,一个培养筒可提取约100mg的RNA量。并可通过调整剪切力大小诱导内皮细胞发生形态改变,模拟体内正常与异常血压;
9) 人工器官研究 Artificial Organ Research;
10) 干细胞培养与其他细胞外基质和细胞 因子培养
外观尺寸: 20 cm X 38 cm X 20 cm
重量: 4.2 kg
电源:100/120/220 V;50/60 Hz
FiberCell中空纤维细胞培养系统Duet泵适合FiberCell所有的中空纤维培养筒。Duet泵可以同时启动2个培养筒。
恒定流量与溶氧处理是中空纤维细胞培养系统模型的关键。FiberCell Duet泵可以根据使用的培养筒来调节流量范围:1 mL/min - 140 mL/min.
Cat# C2025 0.1 µm 孔径提供大的交换速率,活化的纤维质,利于基质蛋白、细胞因子与抗体吸附。是培养内皮细胞与肝细胞的理想纤维质。
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Cat# C2008低的截留分子量 (MWCO 5 kd @ 50%) 亲水性纤维质截留小的分子。建议表达25 kd - 100 kd 重组蛋白。适合培养悬浮细胞系包括CHO, HeLa 与 293细胞。细胞量能达到 109 ,20 mL ECS中重组蛋白的密度达到100 µg/mL 或以上。
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Cat# C2011 高的截留分子量 (MWCO 20 kd @ 50%)亲水性纤维质截留大的重组蛋白。 适合杂交瘤细胞与**细胞培养。 20 kd MWCO 允许TGF beta 与 TNF alpha 分散掉同时保留抗体。细胞量能达到 109 ,每两天能收获 1-20 mg 重组蛋白与 5-100 mg 单抗。
Cat# C5011 类似 C2011 但是是其2倍的生产能力,是C2011单抗密度的2倍。C5011溶氧能力是C2011的2倍。
Cat# C2003低的截留分子量 (MWCO 5 kd @ 50%) 亲水性纤维质截留小的分子。建议表达25 kd - 100 kd 重组蛋白。
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Cat# C2018高的截留分子量 (MWCO 20 kd @ 50%)亲水性纤维质截留大的重组蛋白 。适合杂交瘤细胞与**细胞培养。 20 kd MWCO 允许TGF beta 与 TNF alpha 分散掉同时保留抗体。细胞量能达到 1011 ,每两天能收获75-150 mg 单抗。 适合贴壁细胞系培养如:CHO、 HeLa、293 细胞。 70 mL ECS中重组蛋白收获量达到100 µg/mL/day。
Cat# C4005 C4005培养筒不含导流硅胶管与注氧管。高的总过滤速率与聚砜纤维质比醋酸纤维质更适合重组蛋白的生产。
Cat# C4020C4020培养筒不含导流硅胶管与注氧管。高的总过滤速率与聚砜纤维质比醋酸纤维质更适合重组蛋白与单抗的生产。
型号
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大小
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表面积
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纤维质型号
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包装密度
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ECS 容积
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MWCO 50%
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细胞*大培养量
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C2025
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Small
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75 cm2
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activated PS
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30%
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2.5 mL
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C2008
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Medium
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3000 cm2
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low flux PS
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50%
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20 mL
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C2011
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Medium
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3000 cm2
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high flux PS
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50%
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20 mL
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C2003
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Large
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1.2 m2
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low flux PS
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50%
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70 mL
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C2018
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Large
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1.2 m2
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high flux PS
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50%
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70 mL
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C4005
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X-Large
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2.5 m2
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low flux PS
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50%
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150 mL
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C3008
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Medium
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2000 cm2
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Cellulosic
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38%
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12 mL
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10 kd
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109
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C4020
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X-Large
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2.5 m2
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high flux PS
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50%
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150 mL
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C5011
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Medium
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3000 cm2
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high flux PS
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50%
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20 mL
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20 kd
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2 x 109
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Oxy0.6
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80mls
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6000 cm2
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Hydrophobic
Polyethylene
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N/A
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40 mL
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100 kd
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N/A
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血清替代物 CDM-HD Serum Replacement
特点
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优势
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化学成分限定
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无批次间差异
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无蛋白
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产物纯化简便
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无动物来源
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无不明来源支原体与病毒
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干粉状
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保质期长
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4℃储存
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储存条件简单
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Optimized for Hollow Fiber Bioreactors
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Increased buffering capacity maintains optimum conditions for protein and antibody production.
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No detergents or other cell membrane stabilizing agents that sometimes interfere with assays or precipitations.
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Composition balanced for high density culture.
CDM-HD 血清替代物包含成分
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CDM-HD 血清替代物不含成分
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氨基酸与代谢物
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蛋白
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维生素
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水解产物
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微量元素
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不确定试剂
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微量营养素
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动物来源成分
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缓冲能力
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类固醇**与多肽
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重组生长因子
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酚红
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碳水化合物,含1g/L glucose
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表面活性剂
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所有组分分子量不超过3kd
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合成聚合物等高分子量物质
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Notes:
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CDM-HD will not require any adaptation but is optimized for cells growing at high density. For best results switch to CDM-HD after cells have reached a high density inside the FiberCell® Systems hollow fiber bioreactor, typically after one week of culture or so.
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CDM-HD does not contain any carbon source. When working with a low glucose medium such as RPMI it is important to supplement the glucose concentration to 4.5 grams per liter.
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CDM-HD is protein free and does not contain any cell attachment factors. When innoculating cells in medium containing CDM-HD add 10% FBS to the cell innoculum only. This will provide the required attachment factors for adherent cells. This is not required for suspension cells though hybridoma cell lines should be treated as adherent cells.
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CDM-HD can be used in other culture systems such as spinner culture and roller culture. For these applications add plurionic F60 or some other cell membrane protecting surfactant.
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CDM-HD is protein free. The secreted protein of interest may be the only significant protein present in your cell culture supernatant. You should re-evaluate your purification protocols as entire steps can sometimes be eliminated, increasing yield. Keep in mind that CDM-HD is protein free and contains no ferritin so the free iron levels will be higher than in standard mediums. Pay attention to any chelating agents that may be part of your buffers or purification protocol.