Gelfree 8100 微量蛋白质制备系统
随着生物质谱技术的快速发展，蛋白质和多肽分析的分辨率、灵敏度、准确性、鉴定能力大为提高。尤其是Top-down蛋白质鉴定方法大量使用后，传统的一维、二维电泳或液相色谱等样品制备技术已经不能满足需要。分析前如何降低样品的复杂程度、获得完整蛋白质、富集低丰度蛋白质、降低高丰度蛋白质对低丰度蛋白质的干扰、保留蛋白质的各种翻译后修饰状态、提高样品处理通量等，已成为蛋白质样品制备方法的重要前提。 英国Expedeon公司推出了一套新型的蛋白制备电泳仪— Gelfree 8100 Fractionation System。该系统使用凝胶洗脱液相组分截留电泳技术(gel-eluted liquid fraction entrapment electrophoresis，GELFREE)，基于蛋白质分子量的不同，对完整蛋白质进行分组，使用移液器在液相中回收蛋白质。该系统能在短时间内同时处理8个样品。在3.5kDa—500kDa范围内，相对于其它传统分组方法，具有上样量大、重现性好、分辨率高、回收率高、分离速度快和操作简单的优点。能增大蛋白质组分析的覆盖范围，改善后期质谱分析的结果，提高蛋白质鉴定结果的可信度。 特点及应用 基于分子量的不同对完整蛋白质进行分离纯化，收集; 蛋白质样品在液相中回收，避免了传统一维、二维电泳后的染色和条带或点位切割步骤; 蛋白质分离范围高达3.5kDa—500kDa; 8个分组通道，满足高通量样品处理的要求，每个通道*多可将样品分为30个组分; 用户可根据需要自行设置蛋白质分组程序，分离纯化特定的目标蛋白; 样品容量大，每个通道蛋白质上样量*高可达1mg，是普通一维电泳的5倍以上，有利于富集低丰度蛋白质; 回收率高，>80%; 重现性好，CV<15%; 分离过程不受蛋白质疏水性或等电点的影响,这就意味着你几乎覆盖整个蛋白质组。 简化蛋白质组成的复杂程度，缩小复杂蛋白质样品的动态范围，便于使用LC-MS/MS进行Bottom-Up蛋白质组学研究; 蛋白质回收后保留其完整性，便于进行Top-Down蛋白质组学研究，分析翻译后修饰、蛋白质异构体、氨基酸衍生物等; 蛋白质回收后在溶液内消化，免去了费时的胶内消化步骤; 特别适合为LC-MS/MS、MALDI-TOF或**印迹等分析方法制备样品;
Gelfree 8100蛋白制备电泳仪由主机和8通道电泳槽两部分构成。主机设计紧凑，能为8个独立的电泳通道提供电压,设置暂停用于收集组分。使用触摸屏，可以设置电压、组分系列和使用的通道数等参数，进行宽范围的组分分析或目标蛋白的富集。运行过程中，触摸屏实时显示每个通道电泳状态及电压电流值。 电泳槽由五个部分组成，分别是：阴*缓冲液槽、上样槽、电泳凝胶管、样品收集槽、阳*缓冲液槽。电泳凝胶管是内装预制SDS-PAGE胶的玻璃管。缓冲液槽与上样槽及收集槽之间由一个截留分子量为3.5kDa的膜分隔开。 电泳槽套盒：
一次性电泳槽套盒含8个独立通道，可同时或分别使用1—8个通道，处理1—8个样品，未使用的通道可保存供以后使用。针对不同的需求，提供四种电泳槽套盒供选择。 Gelfree 8100蛋白制备电泳仪的工作原理：